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ELISA试剂盒实验的影响因素
咱们技术人员通过几年的试验调查,以为影响ELISA试验的要素有如下三方面:
一、试剂盒
1、抗原、抗体活性对效价的影响:主要是试剂中抗体(或抗原)的效价下降或失活,成果不易判别。再有ELISA试剂盒灵敏度高,对杂质的反响灵敏度也高,试验中空白对照OD值偏高或假阳性;
2、酶物浓度过高,也会致使OD值假性增高。
二、ELISA试剂盒试验仪器
1、加样器是不是通过校正,酶免测定血清用血量很少,如手工加样器的功能欠好,汲取样品不,会使成果忽高忽低;
2、每次洗板前,应查看洗板机针孔有无堵塞。
三、操作
1、检查前先将试剂盒从冰箱取出置室温平衡20min后运用,试剂用完及时放回冰箱冷藏,避免形成试验成果假性下降;
2、加样时留意勿触及包被板底部,避免擦伤包被物使抗体(抗原)掉落而影响试验成果的性;
3、洗刷不充分,会使成果假性增高,过分洗刷呈假阴性;
4、比色时应坚持包被孔底部无异物、无水汽,特别是冬天板从37℃水浴箱取出时,底部留有水汽,应将板底擦干后进行比色,水汽或孔内气泡也会使OD值增加;
5、抗原与抗体反响到达*平衡,依赖于温度与时刻。温度高于45℃易引起失活及符号物掉落,温度低于4℃,影响反响速度。
总归,由于ELISA试剂盒试验的影响要素较多,在实际工作中有必要操作标准、细心,避免和扫除各种要素的影响,使之得到牢靠的查验成果。