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单克隆与多克隆抗体的区别是什么?
首先要从抗体的产生来探讨。把某一抗原免疫某种动物而得到单抗或多抗。如果用经免疫过的动物的脾细胞获得杂交瘤细胞,则得到单克隆抗体,如果用动物的血清, 则得到多克隆抗体。
但从理论上说,这些抗体都应针对抗原来自的动物,例如如果用人蛋白抗原免疫小鼠,则这些抗体为鼠抗人。由于一个大蛋白分子表面具有多种 抗原决定簇,因此,免疫动物后,这些不同的决定簇分别诱导动物产生不同的抗体,每种抗体的特异性不同。单抗是有单个细胞起源的细胞克隆分泌的,所以只针对 蛋白抗原的单一抗原决定簇,而多抗是有多个不同克隆的B细胞产生的,是多种细胞的混合物,但其中的每一种抗体也只是针对一种决定簇。
多抗混合物中的每一抗 体与蛋白抗原结合的能力是不同的,因此用多抗做实验与用单抗可有其优势,那就是能确保抗体与抗原结合从而显示抗原信息。但也有其缺点,那就是交叉反应,往 往造成假阳性。从理论上说,用人抗原诱导产生的抗体应只能用于人类,但由于动物种属之间,特别是相近的动物之间,如人与猩猩,大鼠与小鼠存在着同源性,导 致抗体的交叉反应,即用一种动物抗原诱导产生的抗体也可与其它一些动物的抗原反应。
一般在商品化的产品说明书上都有说明。由于单抗只针对单一抗原决定簇, 因此,其能导致的交叉反应很少,而多抗是混合物,导致的交叉反应就多一些。但并不是向你所认为的那样,多抗可与所有种属动物反应。在选择抗体时,如果你标 本来源于人,当然应选用如鼠抗人或兔抗人等。
如果抗体来源确实不清,那应该先预实验。选择已知阳性标本,在充分设置阴性对照的前提下,用此抗体染色,看能 否显示阳性结果。
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