酶联免疫试验预备之*洗刷方法

酶联免疫试验预备之*洗刷方法

ELISA试剂盒剖析洗刷的方法除某些 ELISA 仪器配有特别的自动洗刷仪外，手工操作有浸泡式和流水冲刷式两种，进程如下：
(1)浸泡式
a.吸干或甩干孔内反响液；
b.用洗刷液过洗一遍(将洗刷液注满板孔后，即甩去)；
c.浸泡，行将洗刷液注满板孔，放置1-2 分钟，间歇摇摆，浸泡时刻不行随意缩短；
d.吸干孔内液体。吸干应*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洗毛巾或吸水纸上拍干；
e.重复操作c 和d，洗刷3-4次(或按阐明规则)。在间接法中如本底较高，可增加洗刷次数或延伸浸泡时刻。微量滴定板多选用浸泡式洗刷法。洗刷液多为含非离子型洗刷剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的是疏水性的，非离子型洗刷剂既含疏水基团，ELISA试剂盒也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键，然后削弱蛋白质与固相载体的，并借助于亲水基团和水分子的作用，使蛋白质回复到水溶液状况，然后脱离固相载体。洗刷液中的非离子型洗刷剂一般是吐温 20，其浓度可在0.05%-0.2%
之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
zui初用于小珠载体的洗刷，洗刷液仅为蒸馏水乃至可用自来水。洗刷时附接一特别设备，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲刷 2 分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2 分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲刷式则好比淋浴，其洗刷作用更为*，且也简洁、快速。
已有试验标明，流水冲刷式相同也适用于微量滴定板的洗刷。洗刷时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔外表，洗刷作用更佳。