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RAW264.7细胞培养总结
基本情况: 小鼠来源白血病毒诱导肿瘤细胞,属于巨噬细胞,贴壁生长。
形态以类圆形和不规则为主,一般1~2个核,极少数有3个核,胞浆伸展时胞体较大。镜下细胞为小珍珠似的圆形椭圆形。
2,培养情况
培养条件:10%FBS高糖DMEN,进口gibco血清更好
传代:细胞增殖较快,70%即可传代,细胞有触角也提示需要传代,1:3----1:6传代,推荐使用皿。传代时切记不要使用*,正常情况下此细胞贴壁不牢,直接吹打即可,*消化会使细胞伸出触角改变形态。我是直接用培养基吹打,也可以用PBS,感觉无差异。
冻存和复苏:和普通细胞无异。
RAW264.7作为巨噬细胞有很强的吞噬能力,吞噬抗原后伸出长角,就是大家常见的伪足。同时贴壁黏附能力增强,传代时难以消化下来。
该细胞贴壁时间短,成片生长,似小菌落般小片生
长,zui后连,成一片并会叠层。传代密度不易过高或者过低,过低会导致细胞生长缓慢甚至不生长,过高,细胞会长出伪足。
3, 关于RAW264.7分化,
正常细胞为贴壁不牢的圆形椭圆形细胞,分化后伸出伪足,贴壁能力增强。
避免方法,
1, 血清是进口的真血清
2, 密度不要太高或者太低,由其是需要传代时切不可拖延时间
3, 传代时切不可*消化,直接吹打就能下来
4, 不要污染,包括其他细胞株的污染