ATCC原代细胞的制备流程主要包括组织块培养法和分离细胞培养法。以下是这两种方法的具体步骤：
1.组织块培养法
准备组织材料：将取得的组织材料用培养液湿润，并使用锋利的眼科剪去除脂肪和结缔组织，然后用平衡液（PBS或Hanks液）漂洗多次，直至液体清亮。
剪切组织块：使用眼科弯剪将组织块剪成小块，并用PBS或Hanks液再次漂洗。
放置组织块：用吸管吸取切碎的组织块，轻轻吹到培养瓶皿中，均匀分布，注意不要使组织块与培养液接触。
培养组织块：将培养瓶翻转，使瓶底朝上，在种植了组织块一侧的对侧面加足培养液，塞紧瓶塞后静置于37℃培养箱中。
更换培养液：每隔2到3天更换一次培养液，或者根据培养瓶种颜色的变化确定换液时间。
2.分离细胞培养法
消化组织：首先用细胞分散法收获细胞，随时吸取少量消化液在镜下观察，并根据组织是否分散成细胞团或单个细胞，采取终止消化措施。
制备细胞悬液：低速离心细胞悬液，弃掉上清液，加入含血清的培养液，轻轻吹打制成细胞悬液，计数并用培养液调整细胞密度。
接种细胞：根据培养的细胞类型和实验要求，用吸管吸取一定量的细胞悬液，加到培养瓶中，对于需要特殊底物的细胞，要先将底物涂一层于培养瓶皿底壁，然后接种细胞。
培养细胞：将培养瓶放入37℃恒温箱中培养，每隔2到3天更换培养液一次或根据培养液颜色的变化确定换液时间。
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